Кабінет біологічної безпеки Класу III надає абсолютні гарантії безпеки, що безпечні шафи класу I та класу II не можуть забезпечити. Всі класи 3 класу біологічного захисту є повністю закритими. Експеримент був виконаний повністю через рукавички переднього вікна. Під час щоденної експлуатації внутрішня частина шафи завжди буде мати негативний тиск. Навіть у разі поломки системи запобігання фізичному забрудненню вона може.
Всі біологічні шафи класу 3 захищені чистим повітрям, фільтруються фільтром HEPA та запобігають перехресного забруднення зразка. Вихлопний газ зазвичай фільтрується через HEPA. Або використовуйте два фільтри HEPA поруч. Елементи, необхідні для експерименту, були подані в кабінет разом із каналом ізоляції, розташованим на боці шафи. Шафи безпеки 3 рівня зазвичай спрямовують вихлопні гази в лабораторію. Однак повітря можна також скинути безпосередньо в зовнішнє середовище через зовнішню вихлопну трубу. При використанні системи вихлопного трубопроводу триступеневий кабінет безпеки також підходить для мікробіологічних операцій, які вимагають додавання токсичних хімікатів під час випробування. Усі біологічні шафи класу 3 можуть бути використані в експериментах з мікробіологічного фактору, що включають рівень біобезпеки на рівні 1, 2, 3 і 4.