Усім відомо, що лабораторій багато, то скільки людей знають про ПЛР-лабораторії? А які основні вимоги до проектування ПЛР-лабораторій? Тоді буде VOLAB Xiaobian для обговорення з усіма~
1, схема ПЛР лабораторії
Лабораторія тестування ПЛР-ампліфікації в принципі розділена на чотири окремі робочі зони: зона зберігання та підготовки реагентів, зона підготовки зразків, підготовка реакційної суміші для ампліфікації та зона ампліфікації та зона аналізу продуктів ампліфікації. Щоб уникнути перехресного-зараження, вхід у кожну робочу зону має суворо дотримуватися єдиного напрямку, тобто лише із зони зберігання та підготовки реагентів → зони підготовки зразків → підготовки реакційної суміші для ампліфікації та зони для ампліфікації → зони аналізу продуктів ампліфікації. Передача реагентів і зразків між кожною експериментальною зоною повинна здійснюватися через перевантажувальне вікно.
2. Проектування системи вентиляції кондиціонування повітря лабораторії та регулювання тиску
Лабораторії ПЛР не мають строгих вимог до очищення, але щоб уникнути перехресного-зараження між різними експериментальними зонами, доцільно використовувати повно-систему розподілу повітря. У той же час, пропорція надсилання та виснаження повинна суворо контролюватися, щоб забезпечити вимоги до тиску в кожній експериментальній зоні.
2.1, зона підготовки зразків
Основними операціями в цій галузі є збереження зразків, виділення нуклеїнових кислот (РНК, ДНК), зберігання та їх додавання до пробірок для реакції ампліфікації та визначення синтезу ДНК. Вимоги до градієнта тиску в цій зоні: позитивний тиск відносно сусідньої зони, щоб уникнути аерозольного забруднення з сусідньої зони в цю зону. Крім того, через можливість аерозольного -забруднення під час операції завантаження слід уникати непотрібних прогулянок у зоні.
2.2. Зона зберігання та підготовки реагентів
Основними операціями в цій експериментальній зоні є приготування реагентів для зберігання, дозування реагентів і приготування основних реакційних сумішей. Реагенти та матеріали, що використовуються для підготовки зразків, повинні бути доставлені безпосередньо в цю зону і не повинні проходити через інші зони. Сировина для реагентів повинна зберігатися в цій зоні та готуватися в зоні до необхідних реагентів для зберігання. Жорстких вимог щодо контролю тиску повітря немає.
2.3, область аналізу продукту ампліфікації
Основною операцією в цій області є визначення посилених фрагментів. Ця зона є основним джерелом забруднення ампліфікованого продукту. Таким чином, вимоги до градієнта тиску для цієї зони такі: негативний тиск відносно сусідньої зони, щоб уникнути дифузії посилених продуктів із зони в інші області.
2.4, підготовка реакційної суміші ампліфікації та зона ампліфікації
Основною операцією в цій області є ампліфікація ДНК. Крім того, у цій зоні також можна здійснити додавання підготовленої матриці ДНК (із зони підготовки зразка) та основної реакційної суміші (із зони зберігання та підготовки реагентів) для приготування реакційної суміші тощо. Вимоги до градієнту тиску в цій зоні: негативний тиск відносно прилеглої зони, щоб уникнути витоку аерозолю з цієї зони. Щоб уникнути забруднення, спричиненого аерозолями, слід звести до мінімуму непотрібні прогулянки територією. Окремі операції, такі як відбір проб, слід виконувати в чистому стенді.
3.1. Чіткий розподіл робочої зони
(1) Налаштування кожної експериментальної області є розумним;
(2) Кожна експериментальна зона повинна мати очевидні позначки (наприклад, яскраві номери будинків або різні кольори основи тощо), щоб уникнути плутанини між елементами обладнання та реагентами в різних експериментальних зонах.
3.2, розумні налаштування системи
(1) Розумне налаштування системи вентиляції-кондиціонування повітря, спробуйте використовувати повну-систему кондиціонування повітря-;
(2) Суворий контроль тиску повітряного потоку забезпечує різні вимоги до тиску в різних експериментальних зонах.
3.3, стандартна операція
(1) Технічні працівники лабораторії перевірки ампліфікації повинні проходити--навчання на робочому місці та можуть брати участь у клінічних тестах ампліфікації генів лише після проходження навчання;
(2) Під час експериментальної роботи оператор повинен носити рукавички та часто їх замінювати. Крім того, використання одноразових ковпачків під час роботи також є ефективним заходом запобігання забрудненню;
(3) Очищення проводиться своєчасно та правильно. Після закінчення експерименту ділянку необхідно негайно очистити. На додаток до звичайних дезінфікуючих рідин для дезінфекції поверхонь або опромінення та дезінфекції ультрафіолетових ламп, деяке експериментальне обладнання також слід піддати стерилізації під високим тиском.
3.4, суворе управління
(1) Суворо контролюйте персонал, який входить і виходить з лабораторії. Особи, які не мають відношення до експерименту, не повинні входити або залишати лабораторію за власним бажанням, і, якщо необхідно, вони повинні встановити окремі проходи та двері до та з усієї експериментальної зони.
(2) Зведіть до мінімуму непотрібні прогулянки в експериментальній зоні, щоб зменшити ймовірність перехресного-зараження.
(3) Зона аналізу ампліфікованого продукту є найважливішим джерелом забруднення ампліфікованого продукту. Відпрацьований розчин не можна викидати в лабораторію. Його необхідно змочити в дезінфікуючому розчині, а потім викинути в місці, далеко від лабораторії. Використані насадки одноразові. Матеріали також слід продезінфікувати та стерилізувати, а потім рівномірно обробити, наприклад, спалити;
(4) Область аналізу продукту ампліфікації може використовувати певні генні мутації та токсичні речовини, і особливу увагу слід приділяти захисту безпеки експериментатора.
3.5. Повне лабораторне обладнання
Необхідною умовою для забезпечення експериментальної роботи є повне лабораторне забезпечення. Відповідне обладнання та інструменти мають бути обладнані відповідно до різного експериментального вмісту кожної лабораторії, наприклад ультра-чисті столи, центрифуги та пристрої для подачі зразків.